Метод количественного определения ампициллина

Для испытания подлинности препаратов пенициллинов и их полусинтетических аналогов (за исключением метициллина натриевой соли) используют цветную реакцию, основанную на разрыве в-лактамного цикла и образовании медной соли гидроксамовой кислоты (осадок зеленого цвета):

С солями железа (ЙЙЙ) гидроксамовая кислота образует внутрикомплекс-ные соли красного цвета.

В препаратах пенициллинов можно обнаружить органически связанную серу после превращения ее сульфид-ион сплавлением с едкими щелочами.

В солях бензилпенициллина, метициллина и оксициллина открывают ион натрия, а в калиевой соли бензилпенициллина )после минирализации — ион калия. Новокаиновая соль бензилпенициллина должна давать положительную реакцию на первичную ароматическую аминогруппу.

Подлинность фармакопейных препаратов пенициллинов подтверждают также с помощью УФ- и ИК-спектрофотометрии. ГФ Х и ВФС рекомендуют устанавливать значения оптических плотностей растворов солей бензилпенициллина при длинах волн 280 и 263 нм; метициллина — при 280 и 264 нм; феноксиметилпенициллина — при 268 и 274 нм. Для растворов ампициллина устанавливают значения оптических плотностей в максимумах (256, 261, 267 нм) и минимумах (255, 260, 266 нм) поглощения. ИК-спектры ампициллина, натриевых солей метициллина и оксациллина идентифицируют по совпадению с максимумами светопоглощения соответствующих стандартных образцов.

Пенициллины под влиянием разбавленных минеральных кислот разлагаются с образованием пинициламина и пенальдиновой кислоты, которая декарбоксилирует до пенилового альдегида:

Гидролизат дает характерные реакции на аминокислоты и альдегиды.

Так, препараты природного пенициллина отличают друг от друга по различной окраске продуктов реакции с хромотроповой кислотой в присутствии концентрированной серной кислоты. Ампициллин при взаимодействии с реактивом Фелинга приобретает фиолетовое окрашивание.

В соответствии с требованиями ГФ Х препараты пенициллинов и их полусинтетических аналогов подвергают испытаниям на токсичность, пирогенность, стерильность (ГФ Х, с. 952, 953, 956), а натриевую и калиевую соли бензилпенициллина — также на термостабильность (ГФ Х, с. 981).

Количественное определение по ГФ Х состоит из двух этапов: определения сумы пенициллинов и установления содержания соответствующего препарата.

При анализе препаратов природных пенициллинов (натриевой, калиевой, новокаиновой солей бензилпенициллина и феноксиметил-пенициллина) сумму пенициллинов определяют иодометрическим методом (ГФ Х, с. 980). Сущность способа заключается в том, что продукт инактивации пенициллина (1 н. раствором гидроксида натрия при комнатной температуре) — натриевую соль пенициллоиновой кислоты — окисляют йодом. Процесс окисления необходимо проводить при рН 4,5 (ацетатный буфер).

Схема инактивации и окисления на примере бензилпенициллина:

Сумму полусинтетических пенициллинов в натриевых солях метициллина и оксациллина определяют способом, в основе которого лежит количественно происходящий при нагревании на водяной бане процесс инактивации препаратов 0,1 н. раствором гидроксида натрия до образования производных пенициллоиновой кислоты:

Избыток гидроксида натрия оттитровывают 0,1 н. раствором соляной кислоты (индикатор фенолфталеин).

Второй этап количественного определения — установление содержания соответствующего препарата — выполняют при анализе натриевой, калиевой и новокаиновой солей бензилпенициллина гравиметрическим методом. Бензилпенициллин извлекают амилацетатом и количественно осаждают в виде N-этилпиперидиновой соли:

Спектрофотометрический метод включен в ВФС на некоторые полусинтетические препараты пенициллина, в частности на ампициллин. Расчет концентрации производят после параллельного определения в тех же условиях оптической плотности стандартного образца.

Осадок N-этилпиперидиновой соли бензилпенициллина промывают, высушивают до постоянной массы и взвешивают. Затем делают пересчет на соответствующую соль (ГФ Х, с. 979).

Алкалиметрический метод определения суммы пенициллинов имеет удовлетворительную воспроизводимость, но дает завышенные результаты, так как одновременно титруются все примеси, взаимодействующие со щелочью.

Наиболее точные, сопоставимые с микробиологическим методом результаты дает спектрофотометрическое определение бензилпенициллина, основанное на его гидролизе в кислых буферных растворах до бензилпеницилленовой кислоты. Она имеет максимум светопоглащения при 322,5 нм. Присутствие ионов меди (II) повышает чувствительность реакции и воспроизводимость результатов определения.

Этот способ определения рекомендован для количественной оценки полусинтетических пенициллинов: метициллина, ампициллина, оксациллина, карбенициллина, диклоксациллина идр. Полупродукты синтеза и продукты инактивации не мешают определению.

Общая схема гидролиза пенициллинов в кислой среде с образованием пеницилленовых кислот может быть представлена следующим образом:

Устойчивость в водных растворах у препаратов различна. Натриевая и калиевая соли бензилпенициллина и метициллина разрушаются в водных растворах при нагревании (при комнатной температуре этот процесс происходит медленно). Эти препараты быстро инактивируются под действием кислот и щелочей. Феноксиметилпенициллин, ампициллин и оксациллина натриевая соль устойчивы в слабокислой среде. Препараты природных пенициллинов разрушаются при действии фермента пенициллиназы, синтетические аналоги отличаются устойчивостью к нему.

Суммируя вышесказанное можна выделить основные реакции, используемые для определения подлинности:

1. Реакция с реактивом Феллинга.

Суспендируют 10 мг вещества в 1 мл воды и прибавляют 2 мл смеси, приготовленной из 2 мл реактива Феллинга и 6 мл воды. Тотчас появляется фуксиново-фиолетовая окраска.

Реактив Феллинга представляет собой смесь щелочного раствора сегнетовой соли и раствор меди (II).

Нингидрин окисляет первичную аминогруппу в реакции б-аминофенилуксусной кислоты до бензальдегида и аммиака. Сам нингидрин при этом восстанавливается. В последующей стадии восстановленная форма нингидгина подвергается реакции конденсации с аммиаком с образованием продукта фиолетовой окраски.

Выполнение реакции. Около 50 мг субстанции растворяют в 2 мл воды, добавляют 1 мл 0,2 % раствора нингидрина и выдерживают. Возникает фиолетовая окраска.

1. Реакция с гидрохлоридом гидроксиламина (образование гидроксаматов). Благодаря наличию в молекуле пенициллинов карбамоильной группы -С(О)-N= пеницициллины образуют при взаимодействии со щелочным раствором гидроксиламина гидроксамовую кислоту. Последняя з солями феррума (III) в кислой среде дает комплекс краснофиолетовой окрашивания.

Выполнение реакции. Около 0,1 г растворяют в 2 мл 2 М раствора NaOH , добавляют 0,3 г гидроксиламина гидрохлорида и оставляют на 5 мин. Затем добавляют 2 мл 0,1 М раствора HCl и каплю 1 % раствора FeCl₃; возникает красно-фиолетовая окраска.

4. ИК-спектроскопия. ИК-спектры принято применять для идентификации ампициллина (ВФС 42-676-77, МФ II). Для безводной формы инфракрасный спектр соответствует спектру, полученному со стандартным образцом ампициллина СО, или спектру сравнения ампициллина.

5. УФ-спектры используются для идентификации ампициллина (ВФС 42-676-77, МФ II).

6. Реакция с формальдегидом в сульфатной кислоте. К 2 мг препарата в пробирке прибавляют 1 каплю воды, затем 2 мл серной кислоты (

1760 г/л) и перемешивают, раствор бесцветный. Погружают пробирку на 1 мин в водяную баню; раствор остается бесцветным. Помещают 2 мг препарата во вторую пробирку, прибавляют 1 каплю воды и 2 мл раствора формальдегида в серной кислоте и перемешивают; раствор бесцветный или слегка розовый. Погружают эту пробирку на 1 мин в водяную баню; появляется оранжево-желтое окрашивание (МФ II).

7. Удельное оптическое вращение. При исследовании на чистоту используют раствор препарата с концентрацией 2,5 мг/мл и пересчитывают результат на безводное вещество; [б]_D 20°C =от +280 до + 305 °.

Воду определяют методом Карла Фишера. Для безводной формы используют около 0,8 г вещества; содержание воды не более 15 мг/г.

Для тригидрата используют около 0,1 г вещества; содержание воды не менее 120 и не более 150 мг/г.

рН раствора препарата с концентрацией 2,5 мг/мл 3,5 — 5,0.

1.3.1 Методы количественного определения феноксиметилпенициллина

Спектрофотометрический метод с меркурий-имидазольным реактивом. Образование коплекса с переносом заряда между ампициллином и имидазол-меркуриевым реагентом использовано для спектрофотометрического определения ампициллина путем измерения светопоглощения раствора продукта взаимодействия (МФ ІІ).

лекарственный антибиотик пенициллин ампициллин

источник

Структурной основой лекарственных веществ природных и полусинтетических пенициллинов является 6-аминопенициллановая кислота, которая включает конденсированные тиазолидиновый и лактамный цикл

Лактамный цикл впервые обнаружен в природных пенициллинах и отличается большой лабильностью к воздействию различных факторов.

Специфичность биологической активности пенициллинов прежде всего обусловлена наличием в молекуле тиазолидинового и в-лактамного циклов. Расщепление одного из них приводит к полной потере активности. Важная роль в сохранении антибактериальной активности принадлежит также пространственной конфигурации молекул пенициллинов. Характер группировок, присоединенных к гетероциклической системе в положениях 1 и 3. не оказывает заметного влияния на биологическую активность. Различную химическую структуру может иметь радикал, замещающий атом водорода в аминогруппе, которая присоединена к лактамному циклу в положении 6. Это позволило получить ряд высокоактивных полусинтетических аналогов более устойчивых, чем природный пенициллины. Пенициллин получают путем микробиологического синтеза.

Исследование биосинтеза пенициллина с помощью меченых соединений позволило установить, что формирование молекулы осуществляется за счет содержащихся в питательной среде аминокислот (цистеина, валина) и соответствующих предшественников. Схема биосинтеза молекулы бензилпенициллина заключается в следующем:

Пенициллины за счет наличия в молекуле карбоксильной группы являются кислотами, представляющими собой кристаллические вещества, очень гигроскопичные и легко инактивирующиеся под действием кислот, щелочей и других факторов вследствие гидролиза лактамного цикла и образованием неактивной пенициллиновой кислоты:

В настоящее время из многочисленных известных природных пенициллинов медицинское применение имеют натриевая, калиевая, новокаиновая соли бензилпенициллина, бензатинбензилпенициллин и феноксиметилпенициллин. Полусинтетические пенициллины характеризуются наличием в молекуле ароматического или гетероциклического радикала. Из них наиболее широко применяют ампициллин, оксациллин, карбенициллина динатриевую соль, амоксициллин (табл.10.).

Табл.14. Химическая структура радикалов пенициллинов.

По физическим свойствам природные пенициллины и их синтетические аналоги представляют собой белые или почти белые кристаллические порошки без запаха. Натриевая и калиевая соли бензилпенициллина слегка гигроскопичны. Карбенициллина динатриевая соль гигроскопична, а феноксиметилпенициллин негигроскопичен.

Натриевая и калиевая соли бензилпенициллина, натриевая соль оксациллина, динатриевая соль карбенициллина очень легко или легко растворимы в воде. Новокаиновая соль бензилпенициллина, бензатинбензилпенициллин, феноксиметилпенициллин, амоксициллин и ампициллин мало или очень мало растворимы в воде. Натриевая и калиевая соли бензилпенициллина, феноксиметилпенициллин растворимы в этиловом и метиловом спиртах, новокаиновая соль бензилпенициллина мало в них растворима. В этаноле ампициллин практически нерастворим, натриевая соль оксациллина трудно растворима, а динатриевая соль карбенициллина медленно растворима. Натриевые и калиевые соли пенициллинов, бензатинбензилпенициллин практически нерастворимы в хлороформе и эфире. Феноксиметилпенициллин умеренно растворим в хлороформе, новокаиновая соль бензилпенициллина трудно в нем растворима, бензатинбензилпенициллин легко растворим в диметилформамиде. Амоксициллин нерастворим в бензоле и тетрахлорметане.

Химическая структура основных пенициллинов

Benzylpenicillin Sodium -.бензилпенициллина натриевая соль.

Benzylpenicillin Potassium -.бензилпенициллина калиевая соль

Benzylpenicillin Procaine — бензилпенициллина новокаинова соль.

Benzathine Benzylpenicillin — бензатинбензилпенициллин (Бициллин-1)

Oxacillin Sodium — оксациллина натриевая соль

Carbenicillin Disodiuni — карбенициллина динатриевая соль.

Подлинность природных и синтетических пенициллинов подтверждают с помощью УФ- и ИК-спектрофотометрии. Устанавливают значения оптических плотностей растворов солей бензилпенициллина при длинах волн 280 и 263 нм. У феноксиметилпенициллина при 268 и 274 нм имеются максимумы поглощения, а при 272 нм — минимум, причем отношение оптических плотностей при длинах волн 268 и 274 нм. Для растворов ампициллина устанавливают значения оптических плотностей в максимумах 256, 261, 267 нм и минимумах 255, 260, 266 нм поглощения.

ИК-спектры природных и полусинтетических пенициллинов идентифицируют по совпадению с полосами поглощения соответствующих стандартных образцов в области 4000-400 см? 1 . Подлинность бензилпенициллина натриевой, калиевой, новокаиновой солей и амоксициллина устанавливают также методом ТСХ на силикагеле Н или пластинках Сорбфил с последующим проявлением в парах йода.

Важная физическая константа пенициллинов — удельное вращение водных или спиртовых растворов. Все они вращают плоскость поляризованного света вправо.

Для установления подлинности ампициллина, бензатинбензилпенициллина, а также определения содержания в нем бензилпенициллина используют метод ВЭЖХ. Подлинность подтверждают, сравнивая время удерживания пика со стандартным образцом.

Химические реакции, используемые для испытаний подлинности пенициллинов, основаны на обнаружении в их молекулах различных функциональных групп, продуктов деструкции, атома серы, связанных аминов, катионов калия и натрия.

Для испытания подлинности пенициллинов и их полусинтетических аналогов используют цветную реакцию, основанную на разрыве в-лактамного цикла с образованием внутрикомплексной соли меди (II) с гидроксамовой кислотой, осадок зеленого цвета или железа (III) — красное или фиолетовое окрашивание:

Образование этих солей происходит только в определенных интервалах значении рН.

Во всех пенициллинах можно обнаружить органически связанную серу после превращения ее в сульфид-ион сплавлением с едкими щелочами. Сульфид-ион затем открывают по образованию красно-фиолетового окрашивания после добавления раствора нитропруссида натрия.

Соли бензилпенициллина испытывают на ион натрия или калия. Новокаиновую соль бензилпенициллина подвергают испытанию на первичные ароматические амины, а бензатинбензилпенициллин — на дибензилэтилендиамин. Последний извлекают эфиром и после его удаления действуют раствором дихромата калия и ледяной уксусной кислотой; образуется золотисто-желтый осадок. Извлеченный эфиром дибензилэтилендиамин можно идентифицировать по температуре плавления образующегося пикрата 214°С.

Пенициллины отличают друг от друга по различной окраске продуктов реакции с хромотроповон кислотой в присутствии концентрированной серной кислоты. Образуются продукты реакции, имеющие желтое или желто-зеленое окрашивание.

Ампициллин благодаря наличию в молекуле остатка фениламиноуксусной кислоты дает положительную реакцию с нингидрином подобно аминокислотам, а при взаимодействии с реактивом Фелинга приобретает фиолетовое окрашивание.

Феноксиметилпенициллин отличают от других пенициллинов по отрицательной реакции с концентрированной серной кислотой. Раствор остается бесцветным и после нагревания на водяной бане. Реактив Марки используют для идентификации феноксиметилпенициллина. Наличие в его молекуле феноксиуксусной кислоты обусловливает реакцию гидролиза до фенола и гликолевой кислоты:

Затем за счет взаимодействия фенола с реактивом Марки происходит образование ауринового красителя, имеющего красное окрашивание. При нагревании на водяной бане наблюдается усиление интенсивности окраски. Другие пенициллины не образуют окрашенных продуктов при комнатной температуре, а при нагревании на водяной бане приобретают желтое или оранжево-желтое (ампициллин), темно-желтое (амоксициллин), красно-коричневое окрашивание ( бензатинбензилпенициллин).

Соли бензилпенициллина дают положительную реакцию Витали-Морена подобно производным тропана. При выпаривании их с дымящей азотной кислотой и последующем прибавлении спиртового раствора гидроксида калия и ацетона появляется фиолетовое окрашивание. Если к раствору калиевой или натриевой соли бензилпенициллина прибавлять по каплям 25%-ный раствор хлороводородной кислоты, то в осадок выпадает свободный бензилпенициллин, растворимый в избытке хлороводородной кислоты, а также в этаноле, хлороформе, эфире. Соли бензилпенициллина при кипячении в 4% растворе гидроксида натрия гидролизуются с образованием натриевой соли фенилуксусной кислоты, которая после добавления избытка разбавленной серной кислоты обнаруживается по характерному запаху.

Для идентификации и фотоколориметрического определения солей бензилпенициллина, феноксиметилпенициллина, натриевой соли оксациллина используют реакцию, основанную на образовании полиметиновых красителей. Бензилпенициллин подвергают кислотному гидролизу до бензилпеницилленовой кислоты. Она вступает в реакцию сочетания с производным глютаконового альдегида, который образуется в результате расщепления пиридинового цикла под действием тиоцианата хлора.

В МФ описаны способы установления подлинности пенициллинов, основанные на использовании в качестве реактива пенициллиназы. Последняя, например, у бензилпенициллина новокаиновой соли вызывает изменение окраски раствора нейтрального красного.

Ряд испытание выполняют для установления степени чистоты природных и синтетических пенициллинов. По величине оптической плотности растворов определяют светопоглощающие примеси. Выбор длины волны и допустимые значения оптической плотности зависят от химической структуры испытуемого пенициллина. В некоторых пенициллинах устанавливают допустимое ФС содержание йодсорбирующих примесей (0,5-6%) методом обратного йодометрического определения в фосфатном или ацетатном буфере.

Природные и синтетические пенициллины испытывают на наличие воды по методу К. Фишера и устанавливают рН растворов при водных суспензий потенциометрически. В соответствии с требованиями ФС пенициллины и их полусинтетические аналоги подвергают испытаниям на прозрачность и цветность растворов, микробиологическую чистоту, токсичность, пирогеность, стерильность.

Методом ГЖХ в пенициллинах определяют содержание остаточных растворителей ацетона, метиленхлорида, изопропилового спирта, н-пропанола, изоамилацетата, которые используются в процессе получения и очистки. Испытания предусматривают ФС на бензатинбензилпенициллин, амоксициллин, ампициллин и оксациллина натриевую соль. В ампициллине тем же методом определяют примеси триметиламина до 0,05% и диметил анилина до 0,002%. В бензилпенициллина новокаиновой соли и карбенициллина натриевой соли методом ВЭЖХ определяют содержание бензилпенициллина натриевой соли, а в феноксиметилпенициллине тем же методом — содержание примеси феноксиуксусной кислоты до 0,5%. Метод ВЭЖХ используют также для количественного определения амоксициллина по стандартному образцу с использованием в качестве подвижной фазы ацетонитрила и спектрофотометрического детектора 230 нм.

Количественное определение пенициллинов выполняют химическими методами. В некоторых из них натриевой, калиевой, новокаиновой солях бензилпенициллина, феноксиметилпенициллине и амоксициллине сумму пенициллинов определяют йодометрическим методом. Сущность способа заключается в том, что продукт инактивации пенициллина 1 М раствором гидроксида натрия при комнатной температуре — натриевую соль пенициллоиновой кислоты окисляют йодом. Процесс окисления необходимо проводить при рН 4-5 ацетатный буфер.

Схема инактивации и окисления на примере бензилпенициллина:

Определение суммы пенициллинов выполняют обратным йодометрическим методом. Избыток 0,01 М раствора йода оттитровывают раствором тиосульфата натрия той же концентрации после 20 мин пребывания ее в темном месте (индикатор крахмал). Одновременно проводят контрольный опыте тем же количеством пенициллина, не подвергнутого щелочному гидролизу, а также йодометрическое определение соответствующего ГСО.

Количественное определение натриевой, калиевой и новокаиновой солей бензилпенициллина выполняют гравиметрическим методом. Бензилпенициллин извлекают амилацетатом и количественно осаждают в виде N-этилпиперидиновой соли:

Осадок этилпиперидиновой соли бензилпенициллина промывают, высушивают до постоянной массы и взвешивают. Затем делают пересчет на соответствующую соль.

В новокаиновой соли бензилпенициллина определяют содержание новокаина спектрофотометрическим методом в водно-метанольном растворе при длине волны 290 нм. Содержание новокаина должно быть не менее 39 и не более 42%. Определение можно выполнить нейтрализацией извлеченного хлороформом основания прокаина 0,1 М раствором серной кислоты.

В бензатинбензилпенициллине определяют дибензилэтилендиамина. Его предварительно количественно извлекают эфиром, эфир отгоняют до сухого остатка, который растворяют в ледяной уксусной кислоте и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты индикатор кристаллический фиолетовый или 1-нафтолбензеин.

Сумму полусинтетических пенициллинов в натриевой соли оксациллина и динатриевой соли карбенициллина определяют методом обратной нейтрализации. В его основе лежит количественно происходящий при нагревании на водяной бане процесс гидролиза 0,1 М раствором гидроксида натрия до образования производных пенициллоиновой кислоты:

Избыток гидроксида натрия оттитровывают 0,1 М раствором хлороводородной кислоты индикатор фенолфталеин.

Ампициллин количественно определяют методом титрования, подобно аминокислотам. Навеску растворяют в воде, добавляют разбавленный нейтрализованный раствор формальдегида и через 2 мин титруют раствором гидроксида натрия (индикатор фенолфталеин).

Известен меркуриметрический метод определения ампициллина с использованием в качестве титранта нитрата ртути (II) или хлорида ртути (II). Меркуриметрический метод (с потенциометрическим окончанием) рекомендован НД для количественного определения амоксициллина, содержание которого рассчитывают по разнице между общим количеством пенициллинов и содержанием продуктов разложения. Сумму пенициллинов определяют после щелочного гидролиза амоксициллина до образования производных пенициллонновой кислоты.

Активность пенициллинов устанавливают микробиологическим методом по антибактериальному действию на определенный штамм золотистого стафилококка. Одна единица действия соответствует активности 0,5988 мкг химически чистой натриевой соли бензилпенициллина 1670 ЕД в 1 мг. Микробиологический метод определения пенициллинов дает воспроизводимость результатов 5-10%. Этот метод приведен в ряде ФС как альтернативный вместе с химическим или спектрофотометрическим методом. Алкалиметрический метод определения суммы пенициллинов имеет удовлетворительную воспроизводимость, но дает завышенные результаты, так как одновременно титруются все примеси, взаимодействующие со щелочью.

Наиболее точные, сопоставимые с микробиологическим методом результаты дает спектрофотометрическое определение пенициллинов, основанное на их гидролизе до пеницилленовых кислот. Они имеют максимум светопоглошения при 320-324 или 335 нм. Присутствие ионов меди (II) повышает чувствительность реакции и воспроизводимость результатов определения. Этот способ определения рекомендован для количественной оценки полусинтетических пенициллинов: ампициллина, оксациллина, карбенициллина, диклоксациллина и др. Общая схема гидролиза пенициллинов в кислой среде с образованием пеницилленовых кислот может быть представлена следующим образом:

Феноксиметилпенициллин определяют спектрофотометрическим методом при длине волны 268 нм, используя в качестве растворителя раствор гидроксида натрия 4 мл 0,1 моль/л раствора на 500 мл воды. Параллельно в тех же условиях определяют ГСО феноксиметилпенициллина.

Для определения бензилпенициллина натриевой и калиевой соли, феноксиметилпенициллина, ампициллина и его натриевой соли МФ также рекомендовано спектрофотометрическое определение. Оно основано на взаимодействии раствора указанных пенициллинов при нагревании на водяной бане с имидазолом и хлоридом ртути (II). Светопоглощение полученного раствора измеряют при 325 нм относительно смеси реактивов. Фотоколориметрические методы определения природных пенициллинов основаны на реакциях образования окрашенных гидроксаматов железа или меди.

Пенициллины хранят по списку Б в сухом месте, при комнатной температуре. Упаковывают соли бензилпенициллина во флаконы, герметически закрытые резиновыми пробками, обжатыми алюминиевыми колпачками. На воздухе, при повышении температуры, в присутствии влаги, тяжелых металлов они быстро разлагаются. Калиевая и натриевая соли бензилпенициллина содержат в каждом флаконе по 125 000, 250 000, 500 000 и 1 000 000 ЕД; новокаиновая соль бензилпенициллина и бензатинбензилпенициллин — по 300 000, 600 000, 1 200 000 ЕД. Ампициллин хранят в банках оранжевого стекла вместимостью по 0,5 кг, а феноксиметилпенициллин, амоксициллин и оксациллина натриевую соль — в стеклянных банках или полиэтиленовых пакетах. Карбенициллина динатриевую соль хранят при температуре не выше +5°С, бензатинбензилпенициллин — не выше + 10 ?С, амоксициллин — при комнатной температуре, предохраняют от действия света.

Природные пенициллины применяют для лечения пневмонии, гонореи, сифилиса, раневых и гнойных инфекций, перитонита, дифтерии, скарлатины, ангин различной этнологии и инфекционных заболевании, вызванных чувствительными к пенициллину микроорганизмами. Полусинтетнческие аналоги имеют более широкий спектр антибактериального действия.

Лекарственные препараты пенициллинов отличаются друг от друга по продолжительности действия и по эффективности при различных путях введения. Натриевую и калиевую соли бензилпенициллина вводят главным образом внутримышечно и подкожно по 200 000-1 500 000 ЕД в сутки в 3-6 приемов. Новокаиновая соль бензилпенициллина при внутримышечном введении обеспечивает пролонгированное действие в течение 12-18 ч, а бензатинбензилпенициллин — 1-2 недели. Устойчивость феноксиметилпенициллина, ампициллина, оксациллина и амоксициллина в кислой среде желудочного сока позволяет применять их перорально. Феноксиметилпенициллин назначают внутрь по 0.2 г. ампициллин — по 0,25-0,5 г 4-6 раз в сутки, амоксициллин — по 0,5-1,0 г 3 раза в сутки. Оксациллина натриевую соль вводят внутрь по 0,25-0,5 г суточная доза 3,0 г или внутримышечно до 2,0-4,0 г в сутки. Карбенициллина динатриевую соль вводят внутримышечно по 4,0-8,0 г, а внутривенно капельно — до 20-30 г в сутки.

источник

С солями железа (ЙЙЙ) гидроксамовая кислота образует внутрикомплекс-ные соли красного цвета.

Подлинность фармакопейных препаратов пенициллинов подтверждают также с помощью УФ- и ИК-спектрофотометрии. ГФ Х и ВФС рекомендуют устанавливать значения оптических плотностей растворов солей бензилпенициллина при длинах волн 280 и 263 нм; метициллина — при 280 и 264 нм; феноксиметилпенициллина — при 268 и 274 нм. Для растворов ампициллина устанавливают значения оптических плотностей в максимумах (256, 261, 267 нм) и минимумах (255, 260, 266 нм) поглощения. ИК-спектры ампициллина, натриевых солей метициллина и оксациллина идентифицируют по совпадению с максимумами светопоглощения соответствующих стандартных образцов.

Гидролизат дает характерные реакции на аминокислоты и альдегиды.

Схема инактивации и окисления на примере бензилпенициллина:

Избыток гидроксида натрия оттитровывают 0,1 н. раствором соляной кислоты (индикатор фенолфталеин).

Суммируя вышесказанное можна выделить основные реакции, используемые для определения подлинности:

1. Реакция с реактивом Феллинга.

Реактив Феллинга представляет собой смесь щелочного раствора сегнетовой соли и раствор меди (II).

5. УФ-спектры используются для идентификации ампициллина (ВФС 42-676-77, МФ II).

Для тригидрата используют около 0,1 г вещества; содержание воды не менее 120 и не более 150 мг/г.

рН раствора препарата с концентрацией 2,5 мг/мл 3,5 — 5,0.

лекарственный антибиотик пенициллин ампициллин

источник

1) Метод неводного титрования (титрант — 0,1 М раствор хлорной кислоты) в среде безводной уксусной кислоты (ФС) [см. задачу № 21]. Индикатор -кристаллический фиолетовый.

2) Метод алкалиметрии (титрант 0,1 М раствор гидроксида натрия в присутствии органического растворителя для растворения выделяющегося основания; индикатор — фенолфталеин).

3. Согласно ФС, кодеина фосфат в таблетках «Пенталгин» идентифицируют с помощью метода ТСХ на пластинках в присутствии свидетелей. Система растворителей: ацетон — толуол — диэтиламин (19,5 : 5 : 0,5). После высушивания пластинку проявляют в УФ-свете. Также используют метод ГЖХ. Кодеина фосфат идентифицируют по времени удерживания.

Количественное содержание кодеина фосфата в данной лекарственной форме определяют методом ВЭЖХ. Расчет количества кодеина фосфата проводят по площадям пиков анализируемого и стандартного образцов.

1. Сульфокамфокаин представляет собой смесь сульфокамфорной кислоты и основания новокаина в соотношении 49,6 : 50,4.

В сухом виде смесь расплывается на воздухе, поэтому применяется в виде 10% водного раствора для инъекций.

Это прозрачная слегка желтоватая жидкость, рН 4,2-5,8.

В структуре сульфокамфокаина содержатся: сульфогруппа, кетогруппа, третичная аминогруппа, первичная ароматическая аминогруппа, сложноэфир-ная группа, ароматическое ядро.

2. Выбор реакций для подтверждения подлинности основывается на наличии перечисленных выше функциональных групп.

Сульфогруппу сульфокамфорной кислоты идентифицируют после минерализации с последующим воздействием концентрированной хлористоводородной кислотой. Образуется сульфат-ион, который обнаруживают с хлоридом бария.

Кетогруппа сульфокамфорной кислоты обнаруживается с помощью реакции взаимодействия с 2,4-динитрофенилгидразином. Образуется желтый осадок:

Новокаин обнаруживают с помощью реакций:

а) образования азокрасителя (на первичную ароматическую аминогруппу) [см. задачу № 9].

б) гидроксамовой пробы (на сложноэфирную группу). Возникает вишневое окрашивание:

в) образование основания Шиффа с альдегидами в присутствии конц. хлористоводородной кислоты (оранжевое окрашивание):

3. Количественное определение сульфокамфокаина проводят по основанию новокаина и кислоте сульфокамфорной.

Основание новокаина количественно определяют нитритометрическим методом. Титрант — 0,1 М раствор нитрита натрия, в присутствии хлористоводородной кислоты, катализатор — бромид калия, индикатор — нейтральный красный. Титруют медленно и на холоду:

Кислоту сульфокамфорную определяют алкалиметрически в присутствии хлороформа. Выделяющееся основание новокаина растворяется в хлороформе и не мешает определению кислоты сульфокамфорной.

Кроме того, известны методики фотоколориметрического определения сульфокамфокаина в растворе для инъекций. С этой целью используются либо реакции образования азокрасителя или гидроксамата железа (определение ведется по новокаину), либо реакция образования гидразона желтого цвета с 2,4-динитрофенилгидразином (определение ведется по аниону кислоты сульфокамфорной).

Салициловый эфир уксусной кислоты

Кислота ацетилсалициловая относится к ненаркотическим анальгетикам. Ацетилсалициловая кислота оказывает противовоспалительное, жаропонижающее и болеутоляющее действие. Применяют при лихорадочных состояниях, головной боли, невралгиях, в качестве противоревматического средства, выпускается в виде таблеток по 0,25 и 0,5 г.

2. По химической структуре кислота ацетилсалициловая относится к производным фенолокислот, является сложным эфиром салициловой и уксусной кислот. По физическим свойствам ацетилсалициловая кислота представляет собой бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок без запаха или со слабым запахом. Кислота ацетилсалициловая мало растворима в воде, но легко растворима в растворах гидроксидов щелочных металлов, этаноле, хлороформе. Поскольку в молекуле лекарственного вещества присутствуют ароматическое кольцо, кислота ацетилсалициловая обладает способностью поглощать электромагнитное излучение и для анализа может быть использован метод УФ-спектрофотометрии.

3. Для испытания подлинности кислоты ацетилсалициловой используют реакцию гидролиза сложно-эфирной группы в кислой или щелочной среде с последующей идентификацией продуктов гидролиза:

При подкислении серной кислотой образуется белый кристаллический осадок салициловой кислоты и появляется запах уксусной кислоты:

Осадок отфильтровывают, а к фильтрату, содержащему уксусную кислоту, прибавляют этанол и концентрированную серную кислоту — образуется ук-сусноэтиловый эфир, обладающий характерным запахом фруктовой эссенции:

Салициловую кислоту, оставшуюся на фильтре, растворяют в этаноле и идентифицируют с помощью раствора хлорида железа (III) по образованию окрашивания. Окраска и состав образующихся комплексов непостоянны и зависят от соотношения лекарственного вещества и реактива, а также от pH среды. При pH 2–3 образуется окрашенный в фиолетовый цвет моносалицилат железа (III), при pH 3–8 — красного цвета дисалицилат, а при pH 8–10 — желтого цвета трисалицилат:

При добавлении к раствору ацетилсалициловой кислоты концентрированной серной кислоты ощущается запах уксусной кислоты. При прибавлении к полученному раствору формалина появляется розовое окрашивание (ауриновый краситель):

Количественное определение ацетилсалициловой кислоты проводят, используя метод нейтрализации 0,1 М раствором натрия гидроксида в предварительно нейтрализованном по фенолфталеину этаноле до розовой окраски раствора:

Кислоту ацетилсалициловую количественно можно определить также с использованием физико-химических методов (УФ-спектрофотометрия).

4. Промышленный способ получения кислоты аскорбиновой основан на синтезе из D-глюкозы, которую восстанавливают в D-сорбит каталитическим гидрированием. Важным этапом синтеза является процесс глубинного бактериохимического окисления (брожения) с помощью Acetobacter suboxydans D-сорбита до L-сорбозы:

При количественном определении ацетилсалициловой кислоты необходимо учитывать влияние димедрола и аскорбиновой кислоты. Все три компонента определяются в сумме методом алкалиметрии. Затем определяют содержание димедрола методом аргентометрии и аскорбиновой кислоты методом иодиметрии. Содержание ацетилсалициловой кислоты вычисляют по разнице объемов натрия гидроксида, серебра нитрата и иода:

KIO₃ + 5KI + 6HCl ¾® 3I₂ + 6KCl + 3H₂O

Если титрование проводится в навесках равной массы и титрованными растворами одинаковой концентрации, то содержание кислоты ацетилсалициловой (X) рассчитывают по формуле:

где: V₃ — объем 0,1 М раствора натрия гидроксида, мл;

V₂ — объем 0,1 М раствора серебра нитрата, мл;

V₁ — объем 0,1 М раствора иода, мл;

f₁ — фактор аскорбиновой кислоты;

f₂ — фактор ацетилсалициловой кислоты;

Р — общая масса лекарственной формы, г.

6. Кислоту ацетилсалициловую хранят в сухом месте в хорошо укупоренной таре. Во влажном воздухе постепенно гидролизуется с образованием уксусной и салициловой кислот. Салициловая кислота является специфической допустимой примесью. Содержание салициловой кислоты в ацетилсалициловой кислоте определяют методом фотоколориметрии по реакции с 0,2% раствором железоаммониевых квасцов.

Камфора представляет собой белые кристаллические куски или бесцветный кристаллический порошок, или прессованные плитки с кристаллическим строением. Камфора обладает сильным характерным запахом. Практически нерастворима в воде, легко растворима в этаноле, очень легко в эфире, хлороформе, легко в жирных маслах. Камфора образует эвтектические смеси с ментолом, фенолом, тимолом, хлоралгидратом. Камфора образует сублимат, возгоняясь даже при комнатной температуре, флуоресцирует в УФ-свете.

2. По химической структуре камфора относится к бициклическим терпенам — производным углеводорода камфана. Ввиду наличия в молекуле камфоры двух асимметрических атомов углерода, существуют оптические изомеры d-, 1-и рацемическая камфора. Температура плавления, затвердевания, кипения и значение удельного вращения служат константами, подтверждающими подлинность камфоры. Также для идентификации камфоры используют цветные реакции с фурфуролом или бензальдегидом:

Наличие в молекуле камфоры кетогруппы обусловливает возможность проведения качественных реакций с образованием осадков или окрашенных продуктов:

2,4-динитрофенилгидразон камфоры имеет определенную температуру плавления, являющуюся константой и используемую для подтверждения подлинности камфоры.

Для количественного определения камфоры используют оксимный способ, основанный на взаимодействии камфоры с определенным количеством гидроксиламина гидрохлорида:

Нерастворимый в воде оксим определяют гравиметрическим методом или титруют выделившееся эквивалентное количество хлористоводородной кислоты.

Для испытания подлинности и количественного определения камфоры применяют также метод ГЖХ.

Хранят камфору в плотно укупоренных склянках оранжевого стекла в прохладном, защищенном от света месте, учитывая способность камфоры возгоняться.

Магния сульфат. Magnesii sulfas

Магния сульфат относится к седативным лекарственным средствам. При парантеральном введении в зависимости от дозы, может наблюдаться седатив-ный, снотворный или наркотический эффект. При пероральном применении магния сульфат оказывает послабляющее и желчегонное действие. При внутривенном введении 20-25% растворов — седативное, противосудорожное, спазмолитическое действие.

2. Магния сульфат — бесцветные призматические выветривающиеся кристаллы, легко растворим в воде и практическим нерастворим в этаноле.

3. Подлинность магния сульфата можно подтвердить по образованию нерастворимого в воде, но растворимого в уксусной кислоте осадка фосфата магния-аммония:

Наличие сульфат-иона обнаруживают по реакции с раствором бария хлорида, наблюдая образование белого осадка сульфата бария.

4. Количественное определение магния сульфата проводят прямым ком-плексонометрическим титрованием в среде аммиачного буферного раствора (индикатор — кислотный хром-черный). Титрант 0,05 М раствор трилона Б [см. задачу № 2].

5. Лекарственные средства для парантерального применения должны быть стерильными, практически свободными от видимых механических включений. Инъекционные растворы могут быть изотоничными, изогидричными и изоионичными в соответствии с требованиями нормативной документации.

Лекарственные средства для парантерального применения готовят в условиях, максимально предотвращающих загрязнение готового продукта микроорганизмами и посторонними веществами (асептические условия).

Растворы для инъекций и инфузий до стерилизации подвергаются полному химическому контролю. После стерилизации растворов проводят посерийный контроль по внешнему виду, значению рН, подлинности и количественному содержанию каждого ингредиента. От каждой серии отбирается 1 флакон. Контроль на стерильность и испытания на пирогенность растворов для инъекций и инфузий проводят согласно ГФ XI, а контроль на механические включения в соответствии с инструкцией, включающей первичный и вторичный контроль. Первичный контроль (до стерилизации) осуществляется после фильтрования и фасовки растворов (100% флаконов). Вторичному контролю подлежат все 100% флаконов, которые прошли стадию стерилизации.

Асептически приготовленные растворы просматривают только один раз после розлива или стерилизующего фильтрования.

Инъекционные растворы должны отвечать требованиям нормативной документации по разделам: описание, подлинность, прозрачность, цветность, объем заполнения, механические включения, пирогенность, количественное определение.

По химической структуре дигитоксин относится к группе стероидных О-гликозидов (карденолиды). В медицинской практике дигитоксин применяют при сердечной недостаточности. Формы выпуска — таблетки по 0,0001 г и суппозитории по 0,000015 г. Особенностью дигитоксина является выраженный кумулятивный эффект. По фармакологическому действию относится к кардиото-ническим средствам.

2. Молекула дигитоксина состоит из агликона, имеющего стероидную структуру и являющегося производным циклопентанфенантрена, и сахарной части, связанных между собой гликозидной связью. Гликозидная связь является специфичной для данной группы соединений и представляет собой простую эфирную группировку. Сахарная часть в молекуле дигитоксина состоит из трех молекул D-дигитоксозы:

3. Дигитоксин представляет собой белый кристаллический порошок, практически нерастворим в воде, мало — в этаноле. Поскольку в молекуле дигитоксина присутствуют асимметрические атомы углерода подлинность препарата можно установить по значению удельного вращения. Объективную оценку подлинности позволяет сделать ИК-спектр. Возможно использование УФ-спектрофотометрии для идентификации и количественного определения дигитоксина.

Стероидный цикл в молекуле препарата обнаруживают по реакции Ли-бермана-Бурхардта. Образуется зеленое окрашивание. Пятичленный лактонный цикл открывают по реакции с нитропруссидом натрия в щелочной среде (реакция Легаля) — красное окрашивание, с раствором пикриновой кислоты (реакция Балье) дигитоксин образует оранжево-красное окрашивание:

Дигитоксин хранят по списку А в хорошо укупоренной таре, предотвращающей воздействие света и влаги, способствующих гидролитическому расщеплению.

Этиловый эфир ди-(4-оксикумаринил-3)-уксусной кислоты

Неодикумарин относится к группе препаратов антикоагулянтов непрямого действия и применяется для длительного снижения свертывания крови в целях профилактики и лечения тромбозов, тромбофлебитов, инсультов, инфарктов.

2. Неодикумарин очень мало растворим в воде, мало растворим в этаноле, растворим в растворах гидроксидов щелочных металлов. Наличие хромофорных (кетогруппа, сопряженные двойные связи) и ауксохромных (гидроксильные группы) фрагментов позволяет использовать для анализа лекарственного вещества методы, основанные на поглощении электромагнитного излучения УФ-спектрофотометрию, фотоколориметрию. Подлинность и количественное содержание препарата можно также определить методами ВЭЖХ и ИК-спектроскопии. Так как неодикумарин имеет два спиртовых гидроксила, подлинность также можно установить по температуре плавления диацетата неодикумарина.

3.По химическому строению неодикумарин относится к производным 4-оксикумарина и содержит в своей структуре 2 гетероциклические системы кумарина с оксигруппой в положении 4, связанные между собой метиленовой группой. Кумарин, в свою очередь включает лактонный цикл. При сплавлении со щелочью происходит разрыв лактонного цикла с образованием салицилат-иона, который с раствором хлорида железа (III) образует сине-фиолетовое окрашивание:

При нагревании с 0,1 М раствором натрия гидроксида лактонный цикл неодикумарина раскрывается с образованием фенола, который открывают по реакции получения азокрасителя.

После щелочного гидролиза образуется этанол, который открывают по образованию йодоформа.

4.Количественное определение неодикумарина выполняют гравиметрическим методом после образования диацетата неодикумарина:

Осадок отделяют и высушивают до постоянной массы. Содержание неодикумарина вычисляют по формуле:

где: g₂ — масса гравиметрической формы, г;

g₁ — масса неодикумарина, взятая на анализ, г;

F — гравиметрический фактор.

По эквивалентно выделившемуся количеству уксусной кислоты можно определить содержание неодикумарина методом нейтрализации (параллельно проводят контрольный опыт). Титрант — 0,1 М раствор натрия гидроксида. Ин-дикатор — фенолфталеин. Расчет содержания неодикумарина проводят по формуле:

где: V — объем 0,1 М раствора натрия гидроксида, пошедшего на титрование уксусной кислоты, мл;

V_k — объем титранта, пошедшего на титрование в контрольном опыте, мл;

а — масса неодикумарина, взятая на анализ, г.

Метод нейтрализации используют и для прямого титрования раствора неодикумарина в ацетоне:

В этом методе используют смешанный индикатор (метиловый красный и метиленовый синий). Содержание неодикумарина рассчитывают по формуле:

4. Неодикумарин хранят по списку А в плотно укупоренной таре темного стекла, в прохладном, защищенном от света месте, предотвращая разрушение препарата, связанное с разрывом лактонного цикла и гидролизом сложноэфир-ной группы.

2. Оба вещества являются производными алкилуреидов сульфокислот. Бутамид является и-метилпроизводным, а букарбан — п-аминопроизводным.

Показателями качества по НД являются физические свойства. Бутамид и букарбан представляют собой белые кристаллические вещества. Они практически нерастворимы в воде, растворимы или мало растворимы в этаноле. Ввиду наличия в молекулах сульфамидной группы, они проявляют кислотные свойства и растворимы в растворах щелочей.

Для идентификации бутамида и букарбана используют ИК-спектроскопию. ИК-спектры лекарственных веществ в вазелиновом масле регистрируют в области 4000-650 см»1. Они должны соответствовать спектрам стандартных образцов.

Подлинность бутамида и букарбана можно установить методом УФ-сгтсктрофотометрии по расположению максимумов поглощения и по удельному показателю поглощения в 0,1 М растворе кислоты хлороводородной и 0,1 М растворе натрия гидроксида.

Так как лекарственные вещества являются производными мочевины, подлинность бутамида и букарбана устанавливают также с помощью групповых химических реакций

При нагревании бутамида в растворе гидроксида калия происходит гидролиз с образованием аммиака, который можно обнаружить по запаху или по изменению окраски лакмусовой бумаги:

Аналогичный химический процесс происходит при испытании в тех же условиях букарбана.

Реакция гидролиза происходит при кипячении бутамида или букарбана с кислотой серной разбавленной. Последующее добавление 30%-ного раствора гидроксида натрия приводит к выделению жирных капель аминов, имеющих характерный запах. После более продолжительного нагревания (10-30 мин) в присутствии 50%-ной серной кислоты (с обратным холодильником), последующего охлаждения и нейтрализации выделяется осадок сульфамида.

Наличие серы устанавливают после минерализации. Плав растворяют в кислоте хлороводородной и в фильтрате открывают сульфат-ион.

Растворы бутамида и букарбана при нагревании с 0,2%-ным раствором нингидрина в бутиловом спирте приобретают фиолетовое окрашивание.

Букарбан отличается от бутамида наличием первичной ароматической аминогруппы в молекуле. Способы его испытаний по этой функциональной группе такие же, как и при анализе сульфаниламидов. Для испытания подлинности используют реакцию диазотирования и азосочетания с р-нафтолом в щелочной среде. Появляется красное окрашивание.

3. Количественное определение букарбана проводят по первичной ароматической аминогруппе нитритометрическим методом, устанавливая точку эквивалентности с помощью потенциометра, внешнего или внутренних индикаторов. Букарбан можно количественно определять и бромид-броматометрическим методом.

Количественное определение бутамида проводят методом алкалиметрии. В качестве растворителя применяют диметилформамид, титрантом служит раствор гидроксида натрия (калия), индикатором—тимолфталеин:

Количественное определение бутамида и букарбана проводят методом неводного титрования в среде безводной уксусной кислоты, используя в качестве титранта 0,1 М раствор хлорной кислоты, устанавливая конечную точку титрования потенциометрическим методом, т. к. эти вещества являются слабыми основаниями [см. задачу № 21].

Бутамид и букарбан в лекарственных формах количественно определяют методом УФ-спектрофотометрии в 0,1 М растворе натрия гидроксида.

4. При несоблюдении условий хранения возможен гидролиз лекарственных веществ с образованием сульфонилмочевины или мочевины. Содержание этих примесей определяют методом ВЭЖХ. Хранят лекарственные вещества в сухом, защищенном от света месте, при температуре до 25 °С по списку Б.

Класс соединений: конденсированные производные β-лактамидов тиазо-лидина (пенициллины).

Фармакологическая группа: химиотерапевтические средства — антибиотики группы пенициллина.

Формы выпуска: порошок (натриевая соль) во флаконах 0,25 и 0,5 г; таблетки (в виде тригидрата) по 0,25 г или 0,5 г.

Получение: ампициллин — полусинтетический пенициллин. Процесс получения включает стадии биологического и органического синтеза:

1) Биосинтез бензилпенициллина.

2) Получение 6-аминопенициллановой кислоты (гидролиз пенициллинови выделение 6-АПК).

3) Ацилирование 6-аминопенициллановой кислоты.

2. Молекула ампициллина содержит остаток 6-аминопенициллановой кислоты (6-АПК) и фениламиноацетат. Наличие асимметрических атомов углерода (*) обусловливает оптическую активность молекулы. Определение удельного вращения используется для подтверждения подлинности ампициллина. Бензольное кольцо обусловливает избирательное поглощение в УФ-области спектра. Спектр поглощения в области длин волн 260-280 нм используют для установления подлинности. ИК-спектр, измеряемый в области от 4000 до 400 см’1,также используют для подтверждения подлинности ампициллина.

а) по реакции с хромотроповой кислотой в присутствии серной кислоты концентрированной.

б) наличие β-лактамного цикла позволяет получить гидроксаматы меди или железа (III) [см. задачу № 20].

в) органически связанную серу обнаруживают после минерализации с натрия гидроксидом до сульфид-иона: с нитропруссидом натрия — красно-фиолетовое окрашивание; с ацетатом свинца — черный осадок [см. задачу №20].

г) наличие фениламиноуксусной кислоты подтверждают реакцией с нингидрином [см. задачу № 5].

д) взаимодействие с солями меди приводит к получению комплекса фиолетового цвета — доказывает наличие первичной алифатической аминогруппы:

а) Иодиметрический метод. Сущность метода заключается в том, что продукты гидролиза (пенальдиновая кислота и пеницилламин) окисляются иодом [см. задачу № 20].

б) Спектрофотометрическое определение в УФ-области используется как метод альтернативный химическому для количественного определения ампициллина. Метод заключается в измерении спектров поглощения продуктов гидролиза, имеющих максимум поглощения при 320-324 и 335 нм:

4.Под действием кислорода и влаги воздуха возможно гидролитическое разрушение р-лактамного цикла и потеря антимикробной активности, поэтому ампициллин хранят в виде порошков во флаконах, укупоренных пробками и обжатыми алюминиевыми колпачками.

5.«Уназин» содержит ампициллина натриевую соль и сульбактам (ингибитор Р-лактамаз).

При совместном применении фармакологический (антимикробный) эффект обеспечивает ампициллин, сульбактам подавляет действие Р-лактамазы, предохраняя ампициллин от разрушения.

6. Вещества, нарушающие синтез клеточной стенки, в частности ампициллин, обладают выраженным антимикробным действием и практически не влияютна клетки макроорганизма. Считают, что пенициллины, в частности ампициллин,нарушают разные этапы синтеза клеточной стенки, препятствуя образованию пептидных связей за счет ингибирования фермента транспептидазы.

Ампициллин, по сравнению с бензилпенициллином, устойчив в кислой среде желудка, у него выше всасываемость из ЖКТ, он действует на грамположи-тельные и грамотрицательные микроорганизмы. Он неактивен только в отношении пенициллиназообразующих стафилококков. Пенициллин, в отличие от него, неустойчив в кислой среде желудка. Близкими по действию к «Уназину» являются следующие препараты: «Сультасин» (содержит ампициллин и сульбактам натрия; выпускается в виде порошка для инъекций) и «Панклав» (содержит амоксициллин и клавулановую кислоту, которая также является ингибитором β-лактамазы).

7. «Уназин» выпускают в виде таблеток, порошка для инъекций, суспензии для приема внутрь.

По фармакологическому действию является антибактериальным химио-терапевтическим средством.

2. Наличие бензольного ядра и нитрогруппы обусловливает избирательное поглощение в УФ-области спектра: водный раствор левомицетина имеет максимум поглощения при 278 нм. Качественной характеристикой является удельный показатель поглощения.

Спектр поглощения в ИК-области также используется для установления подлинности вещества.

Молекула содержит асимметрические атомы углерода (*) и поэтому обладает оптической активностью. Удельное вращение является качественной характеристикой левомицетина. Фармакологичекой активностью обладает лево-вращающий изомер.

Гидролиз левомицетина в щелочной среде позволяет доказать наличие в молекуле ароматической нитрогруппы, аминогруппы и органически связанного хлора:

Левомицетин взаимодействует с сульфатом меди с образованием комплексного соединения синего цвета.

Ароматическая нитрогруппа обнаруживается по образованию азокраси-теля после восстановления ее до аминогруппы цинковой пылью в среде серной

кислоты. Одновременно отщепляется органически связанный хлор, который в виде хлорид-иона обнаруживается в растворе по реакции с нитратом серебра:

Нитритометрическое определение после предварительного восстановления нитрогруппы до первичной ароматической аминогруппы (реакцию см. выше).

Конечную точку титрования определяют с помощью внешнего индикатора: иодкрахмальной бумаги [см. задачу № 9].

4. Так как одним из побочных эффектов антибиотиков является развитие дисбактериозов, поэтому сочетание антибиотиков и нормофлоров целесообразно. Антибактериальная активность антибиотиков распространяется как на патогенную микрофлору, так и на нормальную микрофлору. Пробиотики предотвращают дисбактериозы.

Нормофлоры изготавливают из живых активных бактерий, являющихся представителями нормальной микрофлоры кишечника человека: кишечной палочки, бифидобактерий, лактобактерий.

При приеме внутрь содержащиеся в лекарственных препаратах — нормоф-лорах живые антагонистически активные микроорганизмы заселяют кишечник, способствуя нормализации биоценоза и, как следствие этого, восстановлению пищеварительной, обменной и защитной функции кишечника.

Причиной диареи путешественников является нарушение микрофлоры кишечника, следовательно, предпочтительным является применение нормофлоров.

Теобромин и теофиллин являются спазмолитическими средствами. Теобромин используется при резко выраженных спазмах сосудов головного мозга, теофиллин применяют в качестве бронхолитического, умеренно действующего кардиотонического и диуретического средства.

Оба вещества — это производные ксантина, который является конденсированной системой, состоящей из двух гетероциклов: пиримидина и имидазола. Отличаются вещества заместителями у N₁ и N₇ атомов азота. Оба вещества являются алкалоидами и содержат третичные аминогруппы.

2. Подлинность теобромина и теофиллина можно установить по ИК-спектрам поглощения в диапазоне от 4000 до 400 см»1. Наличие системы п-сопряженных двойных связей в пуриновом цикле обусловливает избирательное поглощение растворов обоих веществ в УФ области спектра с максимумами поглощения около 272 нм. Кроме того, идентифицировать теобромин и теофиллин можно методом ВЭЖХ с УФ-детектированием.

3. Наличие третичных аминогрупп в молекулах рассматриваемых веществдает возможность проведения реакций с оеадительными алкалоидными реактивами (раствор иода, реактив Шейблера, реактив Драгендорфа).

Общегрупповой реакцией для алкалоидов производных пурина является мурексидная проба [см. задачу № 2].

Реакции отличия

Теофиллин и теобромин обладают кислотными свойствами (отличие от кофеина), так как имеют атом водорода в 7- и 1-положениях соответственно. На этих особенностях химического строения основаны реакции с хлоридом кобальта и нитратом серебра с получением осадков различного цвета и консистенции:

б) Аналогично протекают реакции с теофиллином [см. задачу № 8]. Методы количественного определения основаны на кислотно-основных свойствах теобромина и теофиллина.

Теобромин имеет электронодонорную группу -СН₃ в положении 7, что усиливает слабоосновные свойства атома азота в 9 положении и позволяет проводить определение теобромина как слабого органического основания методом неводного титрования в среде муравьиной кислоты и уксусного ангидрида.

На кислотных свойствах обоих веществ основан метод заместительной нейтрализации после взаимодействия с серебра нитратом:

Все вышеописанные методы количественного определения применимы для анализа субстанций теобромина и теофиллина.

В лекарственных формах, содержащих теобромин и теофиллин, количественное определение этих производных пурина, чаще всего, проводят методом ВЭЖХ, спектрофотометрическим методами или объемными химическими методами: иодиметрически (теобромин), алкалиметрически (косвенная нейтрализация) (теофиллин).

Папаверина гидрохлорид Дротаверина гидрохлорид

Papaverini hydrochloridum Drotaverine Hydrochloride

6,7-диметокси-1 -(3′,4′- 1-(3,4-диэтоксибензилиден)-

Оба препарата являются производными бензилизохинолина, относятся к группе спазмолитических средств. Получают синтетическим путем, природный папаверин получают из опия. Формы выпуска: в таблетках по 0,04 и 2% раствор в ампулах по 2 мл.

Лекарственные вещества отличаются по внешнему виду. Папаверина гидрохлорид — белый кристаллический порошок. Дротаверина гидрохлорид — свето-желтый или зеленовато-желтый кристаллический порошок. Растворимы в воде оба вещества, так как являются гидрохлоридами. рН растворов слабокислая. Растворы обоих веществ должны быть прозрачными.

Так как продукты деструкции этих веществ окрашены в желтый цвет, поэтому нормирование цветности растворов является необходимым.

Оба вещества являются органическими азотистыми основаниями, производными бензилизохинолина, и вступают в реакции с общеалкалоидными оса-дительными (А) и специальными (Б) реактивами:

А. Реактив Драгендорфа, реактив Шейблера, реактив Майера. Результатами этих реакция являются осадки, окрашенные в различные цвета.

Б. Кислота азотная концентрированная, кислота серная концентрированная, реактив Марки, реактив Фреде, реактив Эрдмана, реактив Манделина. В результате этих реакция образуются окрашенные или флюоресцирующие продукты.

Из физико-химических методов анализа для идентификации возможно использование ИК-спектроскопии в диапазоне 4000 — 400 см -1 .

ЗАДАЧА 36

NaO3S-CH2

Растворы обоих веществ в различных растворителях характеризуются избирательным поглощением в диапазоне длин волн от 220 до 350 нм, что используется для идентификации папаверина и дротаверина.

источник