Ridascreen левомицетин 96 опр

Карточка будет добавлена в Избранное

В случае публикации текущей закупки, она заменит отслеживаемую будущую, Вы получите уведомление

Понравилась закупка? Оцените свои возможности, примите решение об участии, подготовьте необходимые документы

Вы подали заявку на участие в аукционе?

Организатор торгов отклонил Вашу заявку и Вы не согласны с данным решением?

Аукцион! Выигрывает тот, кто предлагает наиболее выгодные условия и цену.

Ожидайте результатов аукциона, отслеживайте соблюдение сроков:

Вы победитель? Поздравляем! Предоставьте Заказчику обеспечение исполнения контракта и подпишите контракт

Строго соблюдайте сроки. Соотношение рабочих и выходных дней не принципиально:

Соотношение рабочих и выходных дней принципиально:

Преимущества для Субъектов Малого Предпринимательства и Социально Ориентированных Некоммерческих организаций:

• Сумма обеспечения — до 2% от стоимости контракта.
• Оплата закупки — не более 15 дней с момента подписания документа о приемке.

Возможно увеличение цены контракта до 15%, но не более начальной цены в случаях:

• Если продавец — организация инвалидов
• Если продавец — предприятие уголовно-исполнительной системы
• Товарам/работам/услугам, произведенным на территории государств — членов Евразийского экономического союза

В данной закупке могут принималь участие только организации — субъекты малого предпринимательства и социально ориентированные некоммерческие организации

Установлен запрет на продажу товаров, происходящих из иностранных государств, работ, услуг, соответственно выполняемых, оказываемых иностранными лицами

В отношении участников закупки установлено требование о привлечении к исполнению договора субподрядчиков (соисполнителей) из числа субъектов малого и среднего предпринимательства

Участниками закупки могут быть только субъекты малого и среднего предпринимательства

источник

Поставка тест-систем для обнаружения остаточных количеств запрещенных веществ в пищевых продуктах для нужд ФГБУ «Ленинградская МВЛ»

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Ленинградская Межобластная Ветеринарная Лаборатория»

Чтобы смотреть документы в системе, даже когда
zakupki.gov.ru не работает, нужно оплатить систему.

ИНН 7810323620 КПП 781001001

Тест-система RIDASCREEN® Nitrofuran AOZ» (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система RIDASCREEN ® Nitrofuran AMOZ (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система RIDASCREEN® Хинолон (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система RIDASCREEN® Streptomycin (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.41.60.395 Тест-системы прочие

Тест-система «RIDASCREEN® Aflatoxin M1, (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система «RIDASCREEN® Тестостерон (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система «RIDASCREEN® Зеранол (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система RIDASCREEN® Tetracyclin (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система RIDASCREEN® Рактопамин (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система RIDASCREEN® Хлорамфеникол (левомицетин) (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система MalachiteGreen ELISA kit (малахитовый зеленый), или эквивалент (96 опр.)

ОКПД 24.41.60.395 Тест-системы прочие

Тест-система «RIDASCREEN® β-агонисты, (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система «RIDASCREEN® Пенициллин, (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система «RIDASCREEN® Ацетилгестаген, (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система «RIDASCREEN® Меленгестрола ацетат (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система Ivermectin/Abamectin (ивермектин/абамектин) ELISA Kit (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система «RIDASCREEN® Бацитрацин, (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система RIDASCREEN® Сульфаметазин (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система Gentamicin (гентамицин), ELISA Kit Microtiter Plate, (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

Тест-система Tylosin (тилозин), ELISA Kit Microtiter Plate (96 определений) или эквивалент

ОКПД 24.66.42.342 Тест-системы для определения химического состава биологических проб методами, использующими реакцию антиген-антитело, включая тест-системы для иммунных методов анализа

1. Единые требования к участникам (в соответствии с пунктом 1 части 1 Статьи 31 Федерального закона № 44-ФЗ)
2. Требование об отсутствии в предусмотренном Федеральным законом № 44-ФЗ реестре недобросовестных поставщиков (подрядчиков, исполнителей) информации об участнике закупки, в том числе информации об учредителях, о членах коллегиального исполнительного органа, лице, исполняющем функции единоличного исполнительного органа участника закупки — юридического лица (в соответствии с частью 1.1 Статьи 31 Федерального закона № 44-ФЗ)

Электронный аукцион признан несостоявшимся.

источник

по количественному определению антибактериальных препаратов в продовольственном сырье и продуктах питания животного происхождения методом конкурентного иммуноферментного анализа

Начальник Управления ветеринарии Федерального агентства по сельскому хозяйству В.А.Апалькин 11 октября 2005 года

Продовольственное сырье и пищевые продукты животного происхождения, реализуемые для потребления человеком, не должны содержать остатки некоторых антибактериальных препаратов (например, левомицетина, фторхинолонов и нитрофуранов).

Ветеринарные препараты, использующиеся в терапевтических целях (стрептомицин, пенициллин, тетрациклин, сульфаметазин), применяются под строгим государственным надзором и при условии обязательной выдержки животных перед забоем до полного вывода остатков ветеринарных препаратов из организма животного

Данные меры предпринимаются в развитых странах в связи с серьезной опасностью, которую представляют многие ветеринарные препараты для здоровья человека при их хроническом поступлении

Так, например, остатки антибактериальных препаратов, попадающие в пищевые продукты животного происхождения и далее, в организм человека, угнетают микрофлору кишечника, провоцируют дисбактериоз, проявления аллергического характера, вторичные грибковые инфекции, снижают сопротивляемость организма, могут провоцировать нарушения функции почек и кроветворных органов. Имеются сведения о гемотоксичности и канцерогенных свойствах некоторых сульфаниламидных препаратов, мутагенные и канцерогенные свойства обнаружены также у нитрофуранов.

Левомицетин (хлорамфеникол) обладает гемотоксическими свойствами и может вызвать аплазию костного мозга (потеря способности к кроветворению) и, вследствие этого, апластическую анемию, сопровождающуюся быстрым снижением уровня гемоглобина и эритроцитов в крови. При развитии явлений апластической анемии молодые формы эритроцитов не обнаруживаются не только в крови, но и в пунктате костного мозга

Стрептомицин обладает ототоксичными и нефротоксичными свойствами, вызывает поражения слухового нерва (ототоксичность) и связанные с этим нарушения слуха и вестибулярные расстройства; при нарушениях функции почек возможны также нейротоксические явления.

Особенно чувствительны к стрептомицину лица, перенесшие неврит слухового нерва, инфаркт, страдающие стенокардией, гипертонией, болезнями печени и почек.

Потребление человеком продуктов, содержащих остаточные количества тетрациклинов, приводит к угнетению микрофлоры кишечника, может спровоцировать дисбактериоз, вторичные грибковые инфекции, проявления аллергического характера, вызвать тошноту, рвоту, расстройства функции кишечника, изменения слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта, снижает сопротивляемость организма и повышает устойчивость патогенных микроорганизмов.

Особенно чувствительны к препаратам тетрациклиновой группы беременные, дети раннего возраста, лица, страдающие болезнями печени и почек.

Для определения остатков ветеринарных препаратов в продовольственном сырье и пищевых продуктах используются инструментальные физико-химические методы анализа, такие как жидкостная хроматография высокого давления (ВЭЖХ) и хромато-масс-спектрометрия (ГХ-МС). Эти методы, однако, предусматривают использование дорогостоящего оборудования, нуждающегося в высококвалифицированном обслуживании.

В последнее время для скрининга остатков ветеринарных препаратов применяется удобный и быстрый иммуноферментный метод анализа (ИФА, ELISA), являющийся официальным методом контроля продуктов животного происхождения, принятым в странах Евросоюза (Директива 93/257/ЕЕС).

В основе иммуноферментного метода анализа лежит взаимодействие антигенов (определяемых антибактериальных препаратов) с антителами в лунках микротитровального полистиролового планшета.

Поставляемый планшет сенсибилизирован антителами «захвата», специфичными к антителам к тому или иному антибактериальному препарату (антигену).

Анализ выполняется следующим образом. Исследуемые (стандартные) образцы, препарат, содержащий антитела к определяемому антигену, и препарат, содержащий коньюгат антигена с ферментом, дозируются в лунки сенсибилизированного планшета. При инкубации планшета в течение определенного времени свободные и коньюгированные молекулы антигена, конкурируя между собой, связываются антителами к антигену. В то же самое время при инкубации происходит иммуносорбция этих антител на поверхность лунок планшета за счет их взаимодействия с антителами «захвата» на поверхности.

Далее, путем промывки планшета, из лунок удаляются свободные молекулы коньюгата.

После промывки планшета в его лунки дозируется раствор, содержащий субстрат и хромоген. В процессе инкубации, при химическом взаимодействии субстрата с хромогеном, в котором ферментный фрагмент молекулы коньюгата, связанной на поверхности лунки, выступает в качестве катализатора, образуются окрашенные продукты реакции. После определенного времени развития данной цветной реакции, в результате которой бесцветный хромоген окрашивается в голубой цвет, в лунки добавляется стоп-реагент, при этом голубой цвет раствора меняется на желтый.

Оптическая плотность в лунках, измеренная на планшетном фотометре при 450 нм, обратно пропорциональна концентрации определяемого антибактериального препарата в исследуемых образцах.

А. Количественное определение левомицетина в продовольственном сырье и продуктах питания животного происхождения методом конкурентного иммуноферментного анализа

Набор реагентов «RIDASCREEN Хлорамфеникол» предназначен для количественного определения левомицетина в молоке, сухом молоке, меде, креветках, рыбной муке, мясе и яйцах методом конкурентного иммуноферментного анализа (ELISA/ИФА). В основе процедуры анализа лежит взаимодействие антигенов с антителами.

Поставляемый в комплекте набора планшет сенсибилизирован антителами «захвата», специфичными к антителам к левомицетину. Анализ выполняется следующим образом. Исследуемые (стандартные) образцы, препарат, содержащий антитела к левомицетину, и препарат, содержащий коньюгат левомицетина с ферментом, дозируются в лунки активированного планшета. При инкубации планшета в течение определенного времени молекулы левомицетина и молекулы коньюгата левомицетина с ферментом, конкурируя между собой, связываются антителами к левомицетину. В то же самое время при инкубации происходит иммуносорбция этих антител на поверхность лунок планшета за счет их взаимодействия с антителами «захвата» на поверхности.

Далее, путем промывки планшета, из лунок удаляются свободные молекулы коньюгата.

После промывки планшета в его лунки дозируется раствор, содержащий субстрат и хромоген. В процессе инкубации, при химическом взаимодействии субстрата с хромогеном, в котором ферментный фрагмент молекулы коньюгата, связанной на поверхности лунки, выступает в качестве катализатора, образуются окрашенные продукты реакции. После определенного времени развития данной цветной реакции, в результате которой бесцветный хромоген окрашивается в голубой цвет, в лунки добавляется стоп-реагент, при этом голубой цвет раствора меняется на желтый.

Оптическая плотность в лунках, измеренная на планшетном фотометре при 450 нм, обратно пропорциональна концентрации левомицетина в исследуемых образцах.

1.2.1. Средства измерения

Весы лабораторные общего назначения 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.

Меры массы по ГОСТ 7328.

Спектрофотометр (ридер), снабженный фильтром на 450 нм.

Дозаторы переменного объема на 50, 100, 250, 500 и 1000 мкл.

Цилиндр мерный 2-го класса точности вместимостью 100 мл по ГОСТ 1770.

Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1 и 10 мл по ГОСТ 29227.

1.2.2. Вспомогательные устройства

Центрифуга.

Шейкер типа «вортекс».

Лабораторный встряхиватель.

Гомогенизатор (Stomacher, Ultraturrax).

Микроиспаритель для испарения растворов досуха.

Магнитная мешалка.

Лабораторная посуда (стакан химический вместимостью 250 мл по ГОСТ 25336 или колба коническая со шлифом и притертой пробкой на 250 мл типа КН-1 по ТУ 92-891.029-91*, воронки лабораторные типа В-36 или В-75 по ГОСТ 25336, стеклянный бюкс по ГОСТ 25336).
________________
* ТУ, упомянутые здесь и далее по тексту, не приводятся. За дополнительной информацией обратитесь по ссылке. — Примечание изготовителя базы данных.

Разовые пипетки (пастерки).

Холодильник бытовой.

1.2.3. Реактивы и материалы

Дистиллированная вода.

Этилацетат.

Изооктан/хлороформ (2/3).

Осадитель 1 (Каррез 1) — 0.36 М раствор ферроцианида (II) калия 3 (1,52 г растворить в 10 мл дистиллированной воды).

Осадитель 2 (Каррез 2) — 1.04 М раствор сульфата цинка 7 (2,99 г растворить в 10 мл дистиллированной воды).

В состав набора входят материалы и реагенты в количестве, достаточном для выполнения 96 определений (включая калибровку по стандартным растворам).

Набор содержит:

Микротитровальный планшет на 96 лунок (12 стрипов по 8 лунок), сенсибилизированных антителами «захвата» — 1 шт.

Комплект стандартных растворов левомицетина со следующими концентрациями: 0 нг/л, 500 нг/л, 1500 нг/л, 4500 нг/л, 13500 нг/л, 40500 нг/л, в буферном растворе, концентрат, по 1,3 мл — 6 1 шт.

Коньюгат левомицетина с пероксидазой, концентрат, 0,7 мл: красная крышка — 1 шт.

Антитела к левомицетину, концентрат, 0,7 мл: черная крышка — 1 шт.

Субстрат, содержит пероксид карбамида, 7 мл: зеленая крышка — 1 шт.

Хромоген, содержит тетраметилбензидин, 7 мл: голубая крышка — 1 шт.

Стоп-реагент, содержит 1 N серную кислоту, 14 мл: желтая крышка — 1 шт.

Буфер 1, для разбавления стандартных растворов, коньюгата, антител, растворов образцов и буфера 2, 100 мл — 1 шт.

Буфер 2, для разбавления стандартных образцов при анализе молока, конц., 1 мл — 1 шт.

Режим хранения.

Храните набор при температуре 2-8 °С. НЕ ЗАМОРАЖИВАЙТЕ НАБОР.

Для хранения неиспользованных стрипов (лунок) упакуйте их в оригинальный фольгированный пакет вместе с имеющимся осушителем и плотно закройте пакет.

Поскольку раствор хромогена светочувствителен, избегайте попадания прямых солнечных лучей на флакон с раствором.

Признаки порчи реагентов.

В случае окрашивания раствора хромогена не рекомендуется использовать раствор, поскольку окрашивание раствора хромогена является признаком его порчи.

В случае, если величина оптической плотности, измеренной в лунке с нулевым стандартом, не превышает 0.6, это также может быть признаком порчи реагентов.

Отбор проб осуществляют в соответствии с действующей нормативной документацией по отбору проб.

Пробы доставляют в лабораторию и хранят в холоде в темном месте.

2.1.1. Молоко (только обезжиривание)

— перенесите пробу молока (например, 5 мл) в стеклянную центрифужную пробирку;

— центрифугируйте при 4-12 °С в течение 15-ти минут при 3000 (если у Вас нет центрифуги с охлаждением, охладите пробы до 8 °С перед центрифугированием);

— удалите верхний жирный слой и перенесите аликвоту обезжиренного молока в новую чистую пробирку;

— для анализа используйте 50 мкл раствора на лунку планшета;

Предел количественного определения

Примечание: при приготовлении стандартных растворов используйте буфер 2 (см. п.2.2.5)

Обратите внимание на примечания в конце раздела 2.1.4!

2.1.2. Молоко

— перенесите 5 мл молока в стеклянную центрифужную пробирку;

— добавьте в пробирку 250 мкл осадителя 1 и 250 мкл осадителя 2;

— тщательно перемешайте (например, на вортексе) и центрифугируйте при 4-12 °С в течение 10-ти минут при 3000 (если у Вас нет центрифуги с охлаждением, охладите пробы до 8 °С перед центрифугированием);

— перенесите 2,2 мл супернатанта (соответствует 2 мл молока) в чистую пробирку;

— добавьте в пробирку 4 мл этилацетата и экстрагируйте встряхиванием в течение 10 мин;

— центрифугируйте при комнатной температуре (20-25 °С) в течение 10-ти минут при 3000 ;

— перенесите 2 мл экстракта (соответствует 1 мл молока) в новую чистую пробирку и испарите экстракт досуха при 60 °С в слабом токе азота;

— растворите сухой остаток в 250 мкл буфера 1 и тщательно перемешайте на вортексе;

— для анализа используйте 50 мкл раствора на лунку планшета;

Предел количественного определения

Обратите внимание на примечания в конце раздела 2.1.4!

2.1.3. Сухое молоко

— взвесьте в центрифужной стеклянной пробирке 2 г сухого молока, добавьте 10 мл дистиллированной воды и встряхивайте пробирку до растворения пробы;

— добавьте в пробирку по 1 мл осадителя 1 и осадителя 2;

— тщательно перемешайте (например, на вортексе) и центрифугируйте при 4 — 12 °С в течение 10-ти минут при 3000 (если у Вас нет центрифуги с охлаждением, охладите пробы до 8 °С перед центрифугированием);

— перенесите 3,6 мл супернатанта (соответствует 0,6 г сухого молока) в чистую пробирку;

— добавьте в пробирку 6 мл этилацетата и экстрагируйте встряхиванием в течение 10 мин;

— центрифугируйте при комнатной температуре (20-25 °С) в течение 10-ти минут при 3000 ;

— перенесите 4 мл эфирного экстракта (соответствует 0,4 г сухого молока) в новую чистую пробирку и испарите экстракт досуха при 60 °С в слабом токе азота;

— растворите сухой остаток в 400 мкл буфера 1 и тщательно перемешайте на вортексе;

— для анализа используйте 50 мкл раствора на лунку планшета;

Предел количественного определения

Обратите внимание на примечания в конце раздела 2.1.4!

2.1.4. Мед

— взвесьте в центрифужной стеклянной пробирке 2 г меда, добавьте 4 мл дистиллированной воды и встряхивайте пробирку до растворения пробы;

— добавьте в пробирку 4 мл этилацетата и экстрагируйте встряхиванием по оси «вверх-вниз» в течение 10 мин;

— центрифугируйте при комнатной температуре (20-25 °С) в течение 10-ти минут при 3000 ;

— перенесите 1 мл эфирного экстракта (соответствует 0,5 г меда) в новую чистую пробирку и испарите экстракт досуха при 60 °С в слабом токе азота;

— растворите сухой остаток в 0,5 мл буфера 1 и тщательно перемешайте на вортексе;

— для анализа используйте 50 мкл раствора на лунку планшета;

Предел количественного определения

Сухой остаток после испарения эфирного экстракта не растворяется полностью в буфере 1. Однако, тем не менее, экспериментальная оценка степени извлечения левомицетина показала удовлетворительный результат — более 80%

Примечания:

При исследовании некоторых проб, не содержащих левомицетина, наблюдается матричный эффект, иногда в области концентраций между вторым и третьим стандартами.

В силу возможного матричного эффекта, при исследовании проб по пп.2.1.1-2.1.4. рекомендуется интерпретировать результаты анализа как положительные, если найденная по калибровке концентрация левомицетина превышает концентрацию третьего стандарта.

ВНИМАНИЕ:

При выполнении пробоподготовки по пп.2.1.5 и 2.1.6 холостые пробы могут показывать положительный результат на уровне 2-го стандарта. При расчете концентрации левомицетина в исследуемых пробах рекомендуется учитывать фоновый сигнал с помощью постановки холостого опыта. Для этого в каждой серии анализов полезно выполнять испарение 4 мл чистого этилацетата и далее следовать описанной стандартной процедуре.

Измеренный фоновый сигнал далее следует вычитать на стадии обработки результатов.

2.1.5. Креветки, мясо и рыбная мука

— гомогенизируйте представительную пробу (например, 100 г) в гомогенизаторе, блендере или миксере;

— взвесьте в стеклянной центрифужной пробирке 3 г гомогената, смешайте с 3 мл дистиллированной воды и добавьте 6 мл этилацетата;

— интенсивно встряхивайте пробирку по оси «вверх-вниз» в течение 10 мин

— центрифугируйте при комнатной температуре (20-25 °С) в течение 10-ти минут при 3000 ;

— перенесите 4 мл эфирного экстракта (соответствует 2 г пробы) в новую чистую пробирку и испарите экстракт досуха при 60 °С в слабом токе азота;

— растворите сухой остаток в 1 мл смеси изооктана с хлороформом (2/3) и тщательно перемешайте на вортексе;

— добавьте к раствору 0,5 мл буфера 1 и интенсивно перемешивайте на вортексе в течение одной минуты;

— центрифугируйте при комнатной температуре (20-25 °С) в течение 10-ти минут при 3000 или более высоком ускорении;

— для анализа используйте 50 мкл раствора (водный верхний слой*) на лунку планшета;
_______________
* в случае образования пены или геля в межфазовой зоне при недостаточном объеме водной фазы, поместите пробирку на 5 минут в водяную баню при температуре 80 °С и затем еще раз отцентрифугируйте.

Предел количественного определения

2.1.6. Яйца

— гомогенизируйте представительную пробу (например, 100 г) в гомогенизаторе, блендере или миксере;

— взвесьте в стеклянной центрифужной пробирке 2 г гомогената, смешайте с 12 мл этилацетата;

— интенсивно встряхивайте пробирку по оси «вверх-вниз» в течение 10 мин

— центрифугируйте при комнатной температуре (20-25 °С) в течение 10-ти минут при 3000 ;

— перенесите 6 мл эфирного экстракта (соответствует 1 г пробы) в новую чистую пробирку и испарите экстракт досуха при 60 °С в слабом токе азота;

— растворите сухой остаток в 1 мл смеси изооктана с хлороформом (2/3) и тщательно перемешайте на вортексе;

— добавьте к раствору 1 мл буфера 1 и интенсивно перемешивайте на вортексе в течение одной минуты;

— центрифугируйте при комнатной температуре (20-25 °С) в течение 10-ти минут при 3000 или более высоком ускорении;

— для анализа используйте 50 мкл раствора (водный верхний слой*) на лунку планшета;
_______________
* в случае образования пены или геля в межфазной зоне при недостаточном объеме водной фазы, поместите пробирку на 5 минут в водяную баню при температуре 80 °С и затем еще раз отцентрифугируйте

Предел количественного определения

Примечание: по запросу предоставляются методики для определения левомицетина в сыворотке крови, комбикормах и моче (глюкорониды левомицетина)

Предварительные замечания по проведению измерений

— Перед использованием тест-системы доводят температуру всех реагентов до комнатной.

— Немедленно после использования охлаждают все оставшиеся реагенты до температуры 2-8 °С.

— В процессе выполнения анализа не допускают высыхания лунок планшета.

— Воспроизводимость результатов анализа существенно зависит от тщательности отмывки колонки в процессе пробоподготовки. Внимательно следуют описанной процедуре отмывки колонки.

— На всех стадиях инкубации избегайте воздействия прямого солнечного света. При инкубации рекомендуется прикрыть планшет непрозрачным экраном.

2.2.1. Приготовление раствора коньюгата

Коньюгат левомицетина с ферментом (флакон с красной крышкой) поставляется в концентрированном виде. Поскольку разбавленный раствор коньюгата имеет ограниченную стабильность, следует готовить раствор по потребности. Перед разбавлением концентрированного раствора коньюгата осторожно встряхните содержимое флакона. Для приготовления готового к использованию раствора коньюгата разбавьте концентрат коньюгата буферным раствором N 1, имеющимся в комплекте набора, в отношении 1:11 (например, смешайте 200 мкл концентрата коньюгата с 2 мл буфера — данного разведения достаточно для 4-х стрипов)

2.2.2. Приготовление раствора антител

Антитела к левомицетину (флакон с черной крышкой) поставляются в концентрированном виде. Поскольку разбавленный раствор антител имеет ограниченную стабильность, следует готовить раствор по потребности. Перед разбавлением концентрата антител осторожно встряхните содержимое флакона. Для приготовления готового раствора антител разбавьте концентрат буферным раствором N 1, имеющимся в комплекте набора, в отношении 1:11 (например, смешайте 200 мкл концентрата антител с 2 мл буфера N 1 — данного разведения достаточно для 4-х стрипов).

2.2.3. Приготовление буферного раствора N 2 (только для проб молока)

Для приготовления готового буферного раствора N 2, использующегося при исследовании проб молока, разбавьте концентрат буфера N 2 (флакон с белой крышкой) 9 мл буферного раствора N 1 и энергично перемешайте, (например, с помощью встряхивателя типа «вортекс»), периодически подогревая раствор до 40 °С. Мутность раствора не влияет на результат определения, однако осадок на дне флакона после перемешивания должен равномерно распределяться в объеме раствора.

2.2.4. Микротитровальный планшет, сенсибилизированный антителами

Перед выполнением анализа из планшета следует извлечь необходимое количество стрипов.

Остальные стрипы следует тщательно упаковать в фольгированный пакет вместе с осушителем, закрыть застежку пакета и поместить на хранение при температуре 2-8 °С.

2.2.5. Стандартные растворы

Для приготовления готовых к использованию стандартных растворов левомицетина концентрированные растворы, входящие в состав набора, следует разбавить буфером N 1 (или буфером 2) в указанной пропорции.

Не используйте пластиковую посуду, для разбавления рекомендуется использовать только стеклянную посуду!

После разбавления тщательно перемешайте готовые растворы.

Для каждой серии исследований следует готовить свежие стандартные растворы.

Стандарт 1:50 мкл концентрата N 1+ 450 мкл буферного раствора N 1*

Стандарт 2:50 мкл концентрата N 2 + 450 мкл буферного раствора N 1*

Стандарт 3:50 мкл концентрата N 3+ 450 мкл буферного раствора N 1*

источник